台灣樟芝活性組分 (HS7) 可抑制 CL1-0 人類肺癌細胞中的 AKT-mTOR、ERK 和 STAT3 路徑並誘導 CDK 抑制劑
摘要
圖
圖1
乙醇和…的活性
圖1
乙醇和正己烷萃取物的活性樟腦和…
圖1 樟腦的乙醇和正己烷萃取物以及正己烷萃取物的八個分離組分對CL1-0肺癌細胞生長抑制的活性。 a 用樟腦乙醇或正己烷萃取物處理 72 小時後，測量 CL1-0 細胞的細胞活力。 b 根據薄層色譜中顯示的極性，透過矽膠色譜從正己烷萃取物中分離出八個組分（HS1–HS8）。 c 以正己烷萃取物 (H) 或分離組分 (HS1–HS8) 以 50 μg/mL 的劑量處理 72 小時後，測量 CL1-0 細胞的細胞活力。細胞活力數據（平均值±SE）以與對照組相比的百分比表示，並按照「統計分析」中的描述進行分析。 ***p < 與對照組比較為 0.001
圖 2
吉非替尼（易瑞沙）的作用...
圖2
吉非替尼（易瑞沙）和HS7對CL1-0肺增殖的作用...
> 圖2 吉非替尼（易瑞莎）和HS7對CL1-0肺癌細胞增殖的影響。 a 以吉非替尼處理 72 小時後測量 CL1-0 細胞的細胞活力。 b 以 HS7 處理 72 小時後測量 CL1-0 細胞的細胞活力。 c 處理 72 小時後，以相差顯微鏡檢查 HS7 對 CL1-0 細胞的影響，比例尺 = 100 μm。細胞活力數據（平均值±SE）以與對照組相比的百分比表示，並按照「統計分析」中的描述進行分析。 ***p < 與對照組比較為 0.001
圖 3
HS7 對…的影響
圖3
HS7 對MRC-5 正常胎兒細胞活力的影響…
圖 3 HS7對MRC-5正常胎兒肺纖維母細胞活力的影響。 a 以 HS7 處理 72 小時後測量 MRC-5 細胞的細胞活力。 b 處理 72 小時後，以相差顯微鏡檢查 HS7 對 MRC-5 細胞的影響，比例尺 = 100 μm。細胞活力數據（平均值±SE）以與對照組相比的百分比表示，並按照「統計分析」中所述進行分析
圖4
代表性流式細胞儀直方圖...
圖4
< p> 代表性流式細胞儀HS7 處理後 CL1-0 肺癌細胞的直方圖… 圖 4 HS7 處理 72 小時後 CL1-0 肺癌細胞的代表性流式細胞儀直方圖。 HS7 在 25 μg/mL 劑量下增加了 CL1-0 細胞中的凋亡亞 G1 分數，但在此劑量內沒有顯著改變細胞週期 G0/G1、S 和 G2/M 期的細胞分佈。細胞週期不同階段的細胞百分比如表 1 所示
圖5
HS7 對…的抑製作用
圖5
HS7 對AKT-mTOR 訊號路徑及其抑制下游效應器…
圖5 治療72 小時後，HS7 對CL1-0 肺癌細胞中AKT-mTOR 訊息傳遞路徑及其下游效應器的抑製作用。 a HS7 以劑量依賴性方式降低磷酸化 AKT (p-AKT) 和磷酸化 mTOR (p-mTOR) 的蛋白質量。 b HS7 劑量依賴性地降低磷酸化 p70S6K 蛋白 (p-p70S6K)。 c HS7 劑量依賴性地降低 HIF-1α 蛋白。使用微管蛋白作為上樣對照，以蛋白質印跡分析細胞裂解物
圖6
HS7對…的抑制
圖6
HS7對CL1-0中ERK和STAT3訊號路徑的抑製作用… < /p> 圖6 HS7處理72小時後對CL1-0肺癌細胞中ERK和STAT3訊息傳遞路徑的抑製作用。 a HS7 以劑量依賴性方式降低磷酸化 ERK (p-ERK) 的蛋白質量。 b HS7 劑量依賴性地降低總 STAT3 (STAT3) 和磷酸化 STAT3 (p-STAT3) 的蛋白質水平。使用微管蛋白或GAPDH 作為上樣對照，以蛋白質印跡分析細胞裂解物
圖7
合成抑制劑和…的影響
圖7
合成抑制劑和HS7 對AKT ERK 和STAT3 訊號傳導的影響…
圖 7 治療 72 小時後，合成抑制劑和 HS7 對 CL1-0 肺癌細胞中 AKT ERK 和 STAT3 訊號路徑的影響。 a 以指定劑量的 LY294002（PI3K-AKT 抑制劑）、U0126（MEK-ERK 抑制劑）或 AG490（JAK-STAT3 抑制劑）處理 72 小時後測量 CL1-0 細胞的細胞活力。細胞活力數據（平均值±SE）以與對照組相比的百分比表示，並按照「統計分析」中的描述進行分析。 ***p < 與對照組相比為0.001。 b LY294002、U0126、AG490和HS7對磷酸化AKT（p-AKT）、磷酸化ERK（p-ERK）、ERK、磷酸化STAT3（p-STAT3）和HIF蛋白濃度的影響CL1-0 細胞中的-1α。使用 GAPDH 作為上樣對照，以蛋白質印跡分析細胞裂解物
圖8
HS7 誘導CDK 抑制劑並...
圖8
HS7 誘導CDK 抑制劑並抑制CL1-0 肺中pRb 蛋白的磷酸化...
圖 8 HS7 治療 72 小時後可誘導 CDK 抑制劑並抑制 CL1-0 肺癌細胞中 pRb 蛋白的磷酸化。 HS7 劑量依賴性地增加 p15、p21 和 p27 的蛋白質水平，並降低磷酸化 pRb 蛋白 (p-pRb)。使用微管蛋白或GAPDH 作為上樣對照，以蛋白質印跡分析細胞裂解物
圖9
示意圖顯示了建議的...
圖9
示意圖顯示了HS7 在CL1-0 中的建議作用機制肺…
圖 9 示意圖顯示了 HS7 在 CL1-0 肺癌細胞中的建議作用機制。透過抑制 AKT-mTOR、ERK 和 STAT3 訊號通路，樟芝活性組件 HS7 增加 CDK 抑制劑（p15、p21 和 p27），並導致細胞週期抑制和細胞凋亡誘導。所建議的抑製或增強的參考沿著箭頭或T形條指示。 ERK 細胞外訊號調節激酶、HIF-α 缺氧誘導因子1-α、JAK Janus 激酶、MEK 絲裂原活化蛋白/細胞外訊號調節激酶、mTOR 雷帕黴素哺乳動物標靶、p70S6K 核醣體p70 S6 激酶、PI3K 磷酸肌醇3-激酶、Raf 快速加速纖維肉瘤、STAT3 訊號傳導器和轉錄激活子 3、VEGF 血管內皮生長因子 所有圖 (9)