鑑定並分離在含有肉桂葉萃取物的替代培養基上培養的牛樟芝中具有雙重抗氧化和抗增殖活性的中間代謝物

摘要

真菌牛樟芝已被用作治療多種疾病，尤其是癌症的民間藥物。當A. cinnamomea是在原始寄主－瀕臨滅絕的木本植物Cinnamomum kanehiraiHayata上培養的，該真菌產生的活性成分較多，但生長緩慢。在這裡，C.使用kanehrai葉乙醇萃取物(KLEE)作為C的替代品。 kanehirai 木材到文化 A.肉桂粉在固體培養基上，可縮短培養週期並大量產生活性代謝產物。 A 甲醇萃取物的抗氧化活性。將KLEE（MEAC-KLEE）培養的肉桂進行2,2-二苯基-1-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除作用、還原力、亞鐵離子螯合作用和有效濃度（EC50）評價值分別為0.27、0.74 和0.37 mg·mL-1。透過膜聯蛋白 V 測定，MEAC-KLEE 對非小細胞肺癌細胞系 (A549) 表現出特異性的抗增殖活性。萃取物（MEAC-KLEE）中存在的次級代謝物（2,4-二甲氧基-6-甲基苯-1,3-二醇，DMMB）以高效液相層析（HPLC）純化，並透過核磁共振（NMR）鑑定）光譜。 DMMB對DPPH自由基表現出中等的抗氧化活性和還原能力，EC50值分別為12.97和25.59 μg mL-1，並且還誘導A549細胞凋亡。我們的結果為營養生物技術的DMMB 開發提供了寶貴的見解。 -g0A1 .jpg" alt="圖 A1" />

圖 A1

A.… 菌落形態

圖 A1

樟腦ACT4 菌落的形態。 A. Camphobrata ACT4 培養於…

圖 A1 A. Camphobrata ACT4 菌落形態。 A. Camphobrata ACT4在(a) cPDA培養基上培養29天，(b) JTA培養基培養29天，(c ) JTA -角鯊烯培養基32 天，(d) JTA-KLEE 培養基32 天，(e) JKLWE 培養基32 天，(f ) ) J KFW 培養基 32 天，或 (g) JTA-殼聚醣培養基 39 天。左側顯示菌落形態，右側顯示立體顯微鏡（20×）下的視圖。

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圖 1 在各種培養基上培養的樟芝生長曲線。每個值均表示為平均值±SD (n = 3)。

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圖2

A. cinnamomea 菌絲體、接種培養基（in-medium）和...的ME 的抗氧化活性測定

圖圖2 肉桂菌絲體、接種培養基(培養基內)及新鮮培養基的ME的抗氧化活性測定。 (a) DPPH 自由基清除作用。 (b) 亞鐵離子的還原能力。 (c) 亞鐵離子螯合效應。在 JTA 上培養的肉桂菌絲體的 ME。每個值均表示為平均值±SD (n = 3)。

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MEAC-KLEE 對癌細胞的影響。經過 MEAC-KLEE 處理後，…

圖 3 MEAC-KLEE 對癌細胞的影響。經過 MEAC-KLEE 處理後，(a) A549、(b) HT-29 和 (c) MDA-MB 的活力-231細胞根據基於甲臢的細胞增殖試劑WST-1測定法進行分析。每個值均表示為平均值±SD (n = 3)。

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圖4

MEAC-KLEE ( a ) 及其純化組分( b…

圖4 MEAC-KLEE (a) 及其純化組分(b) 在SPE C18 管柱上的HPLC 指紋圖譜。 " alt="圖5" />

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圖5

< p> DMMB 的抗氧化活性測定。 ( a ) DPPH 自由基清除作用。 (…

圖 5 DMMB 的抗氧化活性測定。(a) DPPH 自由基清除作用。(b) 還原能力。每個值均表示為平均值± SD (n = 3)
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DMMB 對癌症的影響...

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DMMB 對癌細胞的影響經過DMMB 處理後，... < /p> 圖6 DMMB 對癌細胞的影響。經 DMMB 處理後，(a) A549、(b) HT-29 和 (c) MDA-MB-231 的活力根據基於甲臢的細胞增殖試劑WST-1測定法對細胞進行分析。每個值均表示為平均值±SD (n = 3)。 所有人物 (7)