發酵樟腦萃取物可透過調節 NF-?B 和 mTOR 路徑改善 HaCaT 細胞中銀屑病相關的反應
摘要
牛皮癬是一種慢性自體免疫疾病，迄今為止，它仍然是一種不治之症。因此，開發改善該疾病的新藥或製劑將具有市場潛力。台灣樟腦真菌（TC）是台灣特有的真菌。它被證明具有抗癌、抗發炎和保肝作用。然而，TC 發酵萃取物對牛皮癬的作用正在研究中。在本研究中，我們研究了 TC 的抗氧化活性能力以及 TC 對白細胞介素 17 (IL-17A) 誘導的人類角質形成細胞中細胞內氧化壓力、發炎相關和增殖相關蛋白表達的功效。 DPPH自由基清除實驗、還原力實驗和羥過氧化物抑制實驗的結果顯示TC具有很強的抗氧化能力。此外，TC 可以減少 IL-17A 誘導的細胞內 ROS 生成並恢復 NADPH 水平。在發病機制的研究中，我們發現TC可以透過p-IKKα/p-p65和p-mTOR/調節發炎和細胞增殖途徑。總之，TC 顯示出抗氧化、抗發炎和抗銀屑病相關反應等特徵。預計它將被開發為氧化壓力引起的皮膚病或牛皮癬治療的候選藥物。 -23-14623-g001.jpg" alt="圖1" />
圖1
芝麻素和…的HPLC 色譜圖
圖1 < /p>
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圖 1 TC 和標準品中芝麻素和 EK100 的 HPLC 圖譜。 (a) 芝麻素標準品，(b) EK100 標準品，(c) TC 中的芝麻素和 EK100。
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TC 以劑量依賴性方式清除DPPH 自由基。 TC表現出劑量依賴性...
圖2 TC以劑量依賴性方式清除DPPH自由基。 TC表現出劑量依賴性的DPPH自由基清除能力，EC50值為205.7μg/mL。使用抗壞血酸作為陽性對照。評估了治療組和陰性對照之間的顯著差異。 *** p <與對照組相比為0.001。
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TC 顯示濃度依賴還原能力。 TC 表現出劑量依賴性還原能力...
圖 3 TC 顯示濃度依賴性還原能力。 TC 表現出劑量依賴性的還原能力，EC50 值為 857.9 µg/mL。使用抗壞血酸作為陽性對照。評估了治療組和陰性對照之間的顯著差異。 *** p <與對照組相比為0.001。
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TC 以劑量依賴性方式清除H 2 O 2 。 ( a )…
圖 4 TC 以劑量依賴性方式清除 H2O2。 (a) 不同過氧化氫濃度下230 nm吸光度的標準曲線。 (b) TC 對 H2O2 抑制的影響。 TC對H2O2的抑製作用呈現劑量依賴性，EC50值為488.1μg/mL，BHA作為陽性對照。評估治療組和陰性對照之間的顯著差異。 *** p <與對照組相比為0.001。
圖5
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( a ) TC 和( b的效果 ) IL-17A 對細胞…
圖5 (a) TC 和(b) IL-17A 對人類角質形成細胞細胞活力的影響。評估了治療組之間的顯著差異。 ** p < 0.01； *** p <與對照組相比為0.001。
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< p> TC 對細胞的影響...圖6
TC 對IL-17A 誘導的人類角質形成細胞中細胞活力的影響。之間的顯著差異...
圖 6 TC 對 IL-17A 誘導的人類角質形成細胞中細胞活力的影響。評估了治療組之間的顯著差異。 ## p <與對照組相比為0.01。 *** p <與 IL-17A 誘導組相比為 0.001。
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( a ) IL-17A 誘導( < b> b ) TC 抑制IL-17A 誘導的細胞內氧化…
圖7 (a) IL-17A 誘導的和(b b>) TC 抑制人類角質形成細胞中IL-17A 誘導的細胞內氧化壓力。濃度為 50 ng/mL 和 100 ng/mL 的 IL-17A 顯著誘導 ROS 生成，TC 在人類角質形成細胞中以劑量依賴性方式抑制 IL-17A 誘導的 ROS 生成。評估了治療組之間的顯著差異。 ### p <與對照組相比為0.001。 *** p <與 IL-17A 誘導組相比為 0.001。
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TC 恢復IL-17A 處理的人類角質形成細胞中的基礎NADPH 水平。 TC 可以恢復減少的…
圖 8 TC 恢復 IL-17A 處理的人類角質形成細胞中的基礎 NADPH 水平。 TC 可以恢復人類角質形成細胞經 IL-17A 處理後降低的 NADPH 水平。
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< p> TC 抑制IL-17A 誘導的細胞增殖...圖9
TC 透過p -mTOR/ p... 抑制人類角質形成細胞中IL-17A 誘導的細胞增殖...
圖 9 TC 透過 p-mTOR/p-p70S6k 訊息傳遞路徑抑制人類角質形成細胞中 IL-17A 誘導的細胞增殖。 TC 可以抑制 IL-17A 誘導的人類角質形成細胞中 p-mTOR 和 p-p70S6k 的表達，從而可能抑制細胞增殖途徑的過度活化。評估了治療組之間的顯著差異。 ### p <與對照組相比為0.001。 * p < 0.05； ** p < 0.01； *** p <與 IL-17A 誘導組相比為 0.001。
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TC 抑制IL-17A 誘導的與NF-κB 訊號路徑相關的促發炎蛋白的表達. ..
圖10 TC抑制人類角質形成細胞中IL-17A誘導的與NF-κB訊號路徑相關的促發炎蛋白的表達。 TC 可以抑制人類角質形成細胞中 IL-17A 誘導的 NF-κB 表達，從而可能抑制發炎反應。評估了治療組之間的顯著差異。 ### p <與對照組相比為0.001。 * p < 0.05； ** p < 0.01； *** p <與 IL-17A 誘導組相比為 0.001。
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TC 對IL-17A 處理的人類角質形成細胞中IL-6 和IL-8 水平的影響。 （…
圖11 TC 對IL-17A 處理的人類角質形成細胞中IL-6 和IL-8 水平的影響。(a) IL-6 水平。和(b ) TC 並未顯著降低人類角質形成細胞中 IL-17A 誘導的 IL-6 和 IL-8 水準。 ijms-23-14623-g012.jpg" alt="圖12" />圖12
抑制示意圖...
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TC對IL-17A誘導的發炎和增殖的抑製作用示意圖...
圖12 TC對IL-17A誘導的人類角質形成細胞發炎和增殖的抑製作用示意圖。 所有人物 (12)