藥用真菌牛樟芝原生質體製備及再生優化
摘要
牛樟芝是台灣特有的藥用真菌。已發現其富含一些具有抗癌、解酒、免疫調節等藥理活性的化合物。肉桂。因此，我們希望透過研究A來為此目的奠定基礎。肉桂原生質體製備與再生。首先，我們研究了A原生質體製備的最佳化方法。 cinnamomea，並發現了多種可能影響原生質體製備過程中產量的因素，如菌絲年齡、pH值和滲透穩定劑。其次，在原生質體的再生中，我們探討了各種條件對原生質體再生的影響，包括不同的介質和滲透壓。此外，我們發現pH值在3左右的檸檬酸鹽緩衝液顯著增加了A原生質體的再生。 cinnamomea，並提供了一套A的再生方法。 cinnamomea。 />
圖1.
真菌年齡的影響...
圖1.
真菌年齡對原生質體產量的影響肉桂 A. cinnamomea 。 ……
圖 1. 真菌年齡對 A. cinnamomea 原生質體產量的影響。真菌樣本分別來自分生孢子的不同培養時間，分別為16、24、30、36和48小時。消化液含有 0.9 M 蔗糖、50 mM 檸檬酸鹽緩衝液（pH 6.0）和 20 mg mL−1 裂解酶。
圖2.
消化液pH 值的影響...
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消化液pH 值對A 的影響肉桂原生質體產量。總共…
圖 2. 消化液的 pH 值對 A. cinnamomea 原生質體產量的影響。總共 2 × 108 個 30 小時齡幼體在不同 pH 緩衝液下以 20mg mL−1 裂解酶和 1.1M MgSO4 消化液進行消化。 pH緩衝液以50mM磷酸鉀緩衝液製備pH 7.2、pH 6.8和pH 6.4，並以50mM檸檬酸鹽緩衝液製備pH 6.0、pH 5.6、pH 5.2和pH 4.8。
圖3.
滲透穩定劑對…的影響
圖3.
滲透穩定劑對A. cinnamomea的影響原生質體產量。四種滲透穩定劑是…
圖 3.滲透穩定劑對肉桂原生質體產量的影響。原生質體製備測試了四種滲透穩定劑，包括甘露醇 (A)、蔗糖 (B)、KCl (C) 和 MgSO4 (D)。每個反應混合物含有 20mg mL−1 裂解酶、pH 6.0 的 50mM 檸檬酸鹽緩衝液和 2××108 個 30h 幼苗。
圖4.
消化酶濃度的影響...
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消化酶濃度對A 的影響。反應混合物...
圖 4. 消化酵素濃度對 A. cinnamomea 原生質體產量的影響。反應混合物含有2 × 108 個30 小時老幼體mL−1，含有1.1 M MgSO4、pH 6.0 的50 mM 檸檬酸鹽緩衝液和5 種不同濃度的裂解酶（6.25、12.5、25、37.5 和50 mL−1）。
圖5.
固體培養基中的原生質體再生…
圖5.
不同營養物質的固體培養基中的原生質體再生圖 5. 具有不同營養源（MEA、PDA 和無營養的 2% 瓊脂）和滲透壓（0.4 M、0.6 M、0.8 M 和1.0 M 蔗糖）。下黑暗培養7 天。滲透壓對原生質體的影響液體培養中的再生。 A. cinnamomea…
圖 6. 液體培養中滲透壓對原生質體再生的影響。將A.cinnamomea培養在分別含有0.6M、0.8M和1.0M甘蔗糖以及終濃度為50mM檸檬酸鹽緩衝液、pH 3、25rpm、27℃下振盪2天的MEB培養基中。
圖7.
檸檬酸濃度的影響...
圖7.
三種不同環境下檸檬酸濃度的影響營養源，PDB、MEB 和…
圖 7. 三種不同營養源（PDB、MEB 和無營養培養基）中檸檬酸濃度對液體培養中肉桂原生質體再生的影響。
圖 8.
pH 值對…的影響
圖 8.
pH 值對 A. cinnamomea 的影響PDB 和MEB 中的原生質體再生…
圖8. pH 值對含有0.8 M 蔗糖的PDB 和MEB 培養物中A. cinnamomea 原生質體再生的影響。 pH 3、pH 4、pH 5 和pH 6 緩衝液的終濃度為50 mM 檸檬酸鹽緩衝液，pH 7 和pH 8 的磷酸鹽緩衝液。濃度pH 5.1；PDB 初始 pH 4.9）。
圖 9.
檸檬酸濃度的影響…
圖 9.
pH3 時檸檬酸濃度對A. cinnamomea 原生質體再生…
圖9. pH3 時檸檬酸濃度對含有0.8 M 蔗糖的PDB 中A. cinnamomea 原生質體再生的影響。
圖10.
A. cinnamomea 的形態發生…
圖10.
A. cinnamomea 原生質體的形態發生在最佳原生質體再生條件下進行再生。
圖10.最佳原生質體再生條件下肉桂原生質體再生的形態發生。 所有人物 (10)